生姜青枯病病原菌的鉴定与PCR检测方法的建立

摘要：

青枯病是一种严重危害生姜种植的毁灭性土传细菌病害,明确引起生姜青枯病的病原菌并对其进行快速检测,对生姜青枯病早期诊断与有效防控具有重要意义.本研究采用组织分离法,对湖北省恩施生姜病样上的病菌进行分离纯化,通过形态学特征、致病性测定和分子生物学的方法对其进行鉴定;筛选并验证了生姜青枯病菌的特异性引物,优化生姜青枯病病原菌的PCR检测方法,并对该方法进行特异性和灵敏度验证,运用该方法对生姜植株和土壤的病原菌进行检测.结果表明,试验分离纯化得到了10株培养性状一致的菌株,从形态学特征、致病性测定和分子生物学方面,将代表菌株ES202023鉴定为青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum);引物21F/21R从所获菌株中扩增出长度为125 bp的特异性目的条带;通过优化后的PCR体系(25μL:2×Taq Master PCR Mix 12.5μL,21F/21R 0.5μL,退火温度61.1℃,30个循环),使病原菌的检测灵敏度达到10-2 ng/μL,且可以在感病植株及土壤中检测到病原菌.本研究建立的特异性PCR快速检测方法,对生姜青枯病的田间早期预警、姜种带菌检测和绿色防控具有指导作用.

关键词：生姜;青枯病;分离鉴定;PCR检测方法

所属期刊栏目：43

分类号：S632.5;S436.412.1+5(蔬菜园艺)

资助基金：湖北省重点研发项目;重庆调味品产业体系重大专项项目;重庆英才计划创新创业团队项目

在线出版日期：2021-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：10-20