越桔ISSR-PCR反应体系建立与优化

摘要：

以改良CTAB法提取越桔(Vaccinium Linn.)品种薄雾DNA为材料,采用正交设计L16(4 5)袁探讨了Tag酶;Mg2+;DNA;dntps及引物浓度5个主要因素对越桔ISSR-PCR扩增反应的影响,通过直观分析和方差分析结合,建立了越桔ISSR-PCR(20 μL)最佳反应体系,各组分的浓度为:Tag酶0.75 U,Mg2+1.875 mmol/L,DNA 0.8 mmol/L,dntp 0.1 mmol/L,引物0.2 μmol/L.在此基础上探讨了引物UBC835的最佳退火温度、循环次数和延伸时间,结果分别为54.2℃、35次、60s.选用两个引物对21份越桔资源进行ISSR扩增,结果显示优化的体系稳定性较高.

关键词：越桔、简单序列重复区间(ISSR)、正交设计、直观分析、方差分析

所属期刊栏目：39

分类号：S663.9(果树园艺)

资助基金：重庆市科技成果转化项目cstc2013jcsf-nycgzhA80001

在线出版日期：2017-11-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：26-33