山羊 IL-15基因克隆、组织表达谱分析与表达

摘要：

白细胞介素15（Interleukin‐15，IL‐15）是一个多功能细胞因子，在免疫系统和非免疫系统中都有重要作用，包括刺激T细胞增殖和激活自然杀伤细胞，可引起肌肉萎缩性刺激和肌肉收缩反应．但是，在山羊中该基因的研究尚未见报道．该研究采用RT‐PCR方法克隆了山羊肌肉IL‐15基因，使用荧光定量的方法构建该基因组织表达谱．序列分析表明山羊IL‐15包含486 bp全长编码序列，该序列编码162个氨基酸，可形成4‐α螺旋的空间结构，其核苷酸和氨基酸序列与绵羊（97.55％，94.48％）和牛（95.91％，92.02％）的同源性最高，与鸡的同源性最低（48.59％，27.89％）．荧光定量检测表明该基因在肌肉和脾中相对表达量最高，在大脑中相对表达量最低．进一步通过PCR方法获得缺失长信号肽的成熟肽蛋白基因序列，重组到原核表达载体pET32a（＋）中进行原核表达，获得29 kDa的融合蛋白，并通过Western blot 方法进行了鉴定．这些结果说明IL‐15序列在哺乳动物间是保守的，在山羊中的功能与其他动物相似．成功构建的山羊IL‐15表达系统为进一步研究山羊该基因的功能及应用奠定了基础．

关键词：山羊、IL-15、基因克隆、序列分析、基因表达

分类号：S827(家畜)

资助基金：重庆市自然科学基金计划重点项目2009BA1052；中央高校基本科研业务费专项XDJK2011C022．

在线出版日期：2015-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：8-15