新型穿膜肽介导 p53融合蛋白的表达及其免疫原性分析

摘要：

目的：原核表达新型细胞穿膜肽RDP介导p53融合蛋白，并检测其免疫原性的强弱．方法：以质粒pET28a‐p53为模板扩增p53基因，并克隆至原核表达载体pET28a‐RDP中，构建重组表达质粒pET28a‐RDP‐p53，转化至大肠杆菌Rosetta ，IPTG诱导表达蛋白并纯化，SDS‐PAGE确定该蛋白准确性．同时，将昆明小鼠分为空白对照组（等容生理盐水）和RDP‐p53融合蛋白高、中、低剂量（4 mg／kg ，2 mg／kg ，1 mg／kg）组，经腹腔注射免疫，每隔2 d给药1次，30 d后眼球取血，用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清中IgG的含量．结果：双酶切及测序结果显示， p53基因已克隆入表达载体中；RDP‐p53融合蛋白在上清和沉淀中均获得表达．ELISA测定结果表明，与对照组比较，低、中剂量组小鼠血清中IgG含量没有明显升高（p＞0.05），高剂量组显著升高（p＜0.05）．结论：成功表达并纯化RD P‐p53融合蛋白，其免疫原性较弱且与给药剂量相关，为进一步研究RD P‐p53融合蛋白对脑肿瘤的药理作用奠定基础．

关键词：p53、RD P、细胞穿膜肽、免疫原性

分类号：R963(药理学)

资助基金：国家自然科学基金81273416；国家大学生创新实验计划201210635075．

在线出版日期：2015-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：46-51