人组织型纤溶酶原激活剂原核表达载体的构建及在大肠杆菌中的初步表达

摘要：

目的：构建人组织型纤溶酶原激活剂（tissue-typeplasminogenactivator，tPA）原核表达载体，检测其在大肠杆菌Escherichia coli中的初步表达．方法：以含有人tPA基因的质粒为模板，设计引物扩增出含有RGDs-tPA基因并构建到原核表达载体pET28a中，测序证实为正确的rtPA序列，并将pET28a-tPA转化至菌株E．coziBL21（DE3）．用IPTG诱导rtPA在E∞矗中表达，并通过聚丙烯酰胺凝胶电泳（sDsPAGE）进行验证．结果：琼脂糖凝胶电泳获得目的基因片段tPA的条带约在1700bp处，鉴定为阳性重组体；聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定获得目的蛋白片段rtPA的条带约53KDa，为非活性的包涵体．结论：人组织型纤溶酶原激活剂原核表达载体构建成功，可在大肠杆菌中有效表达．

关键词：组织型纤溶酶原激活剂、原核表达载体、转化、表达

所属期刊栏目：34

分类号：Q814(生物工程学(生物技术))

资助基金：重庆市自然科学基金资助项目CSTC2009BB5406

在线出版日期：2012-09-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：71-77