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猪瘟病毒Erns和E2基因在昆虫细胞中的表达研究

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利用昆虫细胞/杆状病毒系统表达猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)Erns和E2基因,用于CSFV新型疫苗以及建立相关的血清学诊断方法等研究.从猪瘟病毒石门株血液样品中提取总RNA,对Erns及E2基因进行扩增,将产物回收后分别连接于T载体,酶切及测序分析后,将其亚克隆至真核表达转移栽体pFastBacHT经重组筛选后获得杆状病毒重组质粒,重组质粒转染昆虫细胞sf9后连续传3~4代,分别收获细胞上清液及沉淀,用于SDS-PAGE及western-blotting试验,检测重组Erns,E2基因表达蛋白.用抗组氨酸(His)单克隆抗体在表达细胞中检测到Erns重组的His标签蛋白;应用抗E2蛋白单克隆抗体在表达细胞及培养上清液中检测到E2基因表达蛋白.结果表明在杆状病毒系统中成功表达了CSFV Erns和E2蛋白.

猪瘟病毒、Erns基因、E2基因、杆状病毒表达系统

33

S852.65+1(动物医学(兽医学))

云南省农业科技创新工程资助项目2008LA019;国家农业公益性行业科研专项基金200803026

2011-08-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

23-27

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西南大学学报(自然科学版)

1673-9868

50-1189/N

33

2011,33(2)

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