山羊KLF8生物学特征及对肌内前体脂肪细胞增殖的影响
旨在克隆山羊KLF8 基因序列,阐明组织表达特性,并初步揭示过表达KLF8 后对山羊肌内前体脂肪细胞增殖的潜在影响.利用逆转录PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法克隆获得山羊KLF8 基因启动子和CDS区序列(coding sequence,CDS),并运用生物信息学方法分析其序列特征;利用基因重组方法构建山羊pcDNA3.1-KLF8 真核过表达载体,利用CCK-8、EdU检测方法和实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)明确KLF8 对山羊肌内前体脂肪细胞增殖的影响.结果显示,获得包含2 个潜在的核心启动子、多个TATA-Box和GATA-Box的山羊KLF8 基因启动子2 001bp和包含KLF家族典型的锌指结构域、发挥转录抑制/激活基序的CDS序列1 062 bp.KLF8 高表达于山羊脾脏组织,极显著高于其他组织(P<0.01),中度表达于肾脏和肺脏组织,低表达于背最长肌和股二头肌.过表达KLF8 抑制山羊肌内前体脂肪细胞增殖,并且这种作用可能是通过上调CCND1 的表达来实现的.结果为明确山羊KLF8 基因生物学特征及对山羊肌内前体脂肪细胞增殖的影响提供重要的数据支撑.
山羊、KLF8、序列特征、肌内前体脂肪细胞、细胞增殖
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S827(家畜)
国家自然科学基金;国家自然科学基金;四川省应用基础研究计划重点项目;西南民族大学中央高校基本科研业务费专项资金项目
2024-01-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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