快速检测猪瘟兔化弱毒疫苗株的TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立

摘要：

在猪瘟病毒兔化弱毒疫苗株(HCLV)的5′端非编码区设计一对引物和一条TaqMan探针, 通过优化反应条件, 成功建立了特异性检测HCLV的荧光定量RT-PCR方法. 结果表明:该方法检测的最低拷贝数为45拷贝/μL, 灵敏度比普通PCR方法高104倍, 在较广的范围内(4.5×101～4.5×106 拷贝/μL)有良好的线性关系(r=0.994);分别以乙型脑炎病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、副猪嗜血杆菌、牛病毒性腹泻/黏膜病病毒作为模板进行TaqMan RT-PCR扩增, 未出现阳性信号;4个不同浓度标准品组内试验变异系数为1.90%～5.82%, 组间试验变异系数为4.02%～5.69%;HCLV 3个cDNA样本组内试验变异系数为3.72%～4.93%;组间试验变异系数为2.99%～4.02%. 该方法具有很好的灵敏性、特异性及稳定性, 能够快速准确定量检测HCLV, 为HCLV疫苗的研制、猪瘟病毒分子生物学等方面研究提供了一种快捷有效的工具.

关键词：猪瘟兔化弱毒疫苗株(HCLV)、荧光定量RT-PCR、TaqMan荧光探针、定量检测

所属期刊栏目：35

分类号：S858.28(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2009-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：92-97