文昌锥SRAP-PCR体系优化及有效引物筛选

摘要：

通过单因素试验和正交试验相结合,分析DNA、引物、dNTPs、TaqDNA聚合酶4种因素对文昌锥SRAP-PCR扩增结果的影响,优化建立文昌锥SRAP-PCR体系.结果表明:文昌锥基因组DNA浓度和dNTPs浓度过低或过高均扩增不出产物,而引物浓度和Taq酶用量的增加能提高扩增效率.在适宜浓度范围内,各个因素对文昌锥SRAP-PCR扩增影响大小依次为:引物=dNTPs＞Taq酶＞DNA;最优反应体系为:总体系为20 μL时,DNA 20 ng,引物0.6μmol/L,dNTPs 0.15mmol/L和Taq酶4U.经验证,该体系获得的扩增产物清晰、稳定;筛选获得45对有效性引物组合多态性好,可应用于SRAP分子标记技术在文昌锥资源研究.

关键词：文昌锥、SRAP、反应体系、引物

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分类号：S792.99(森林树种)

资助基金：海南省重点研发计划项目;2019年度海南省省属科研院所技术开发研究专项"热带特色经济植物种质资源收集、保存与评价"资助

在线出版日期：2021-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：39-46