云南松胚乳DNA提取与ISSR-PCR反应体系的建立

摘要：

以云南松胚乳为试验材料,用改进的SDS法进行DNA的提取,并对其纯度、浓度及产率进行检测,结果表明:DNA扩增效果良好,完全能满足进一步试验的需要;采用单因子试验分析法分别研究模板DNA浓度、引物浓度、Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶用量、dNTP浓度、退火温度对反应体系的影响,建立并优化云南松ISSR-PCR 20μL反应体系:buffer(10mmol/L Tris-HCl,50mmol/L KCl,0.1%Triton X-100 pH 9.0),0.3μmol/L引物,1.5mmol/L MgCl2,0.5U TaqDNA聚合酶,0.2mmol/L dNTPs,30ng模板DNA,引物(GA)8的最适退火温度为52.5℃.

关键词：云南松、胚乳DNA提取、ISSR分子标记

所属期刊栏目：29

分类号：S791.257.01(森林树种)

资助基金：云南省科技厅应用基础研究面上项目2006C0079M

在线出版日期：2009-06-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：27-30