鼠NF～IL～6反义真核表达载体的构建和鉴定

摘要：

目的 构建包含鼠细胞转录因子白介素6 (NF-IL6)反义基因的部分功能区的重组反义真核表达载体pcDNA3.0/ NF-IL6,为进一步研究鼠巨噬细胞中NF-II6的功能奠定基础.方法 Trizol试剂法提取体外分离培养的鼠巨噬细胞总RNA,经逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增NF-IL6基因目的 片段,PCR产物及真核表达载体pcDNA3.0分别双酶切并进行连接,转化入大肠杆菌Ecoli Dh5α扩增后获得重组载体.结果 RT-PCR获得预期大小的特异性NF-IL6DNA片段,经PCR、双酶切及测序分析证实已将鼠NF-1L6 cDNA片段正确的反向插入真核表达载体中.结论 成功获得反义pcDNA3.0/ NF- IL6重组质粒.

关键词：NF-IL6、反义核酸、巨噬细胞

所属期刊栏目：13

分类号：R392.11

资助基金：四川省卫生厅项目100208

在线出版日期：2011-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：810-813