猪流行性腹泻病毒抑制干扰素λ的病毒蛋白筛选及验证

摘要：

旨在验证猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异株在非洲绿猴胚胎肾细胞(MARC-145)上是否具有抑制宿主III型干扰素λ(IFN-λ)的能力,筛选并鉴定介导抑制宿主IFN-λ的病毒蛋白.通过预测猪IFN-λ1 和IFN-λ3 启动子序列,以提取的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)基因组DNA为模板,扩增启动子序列,构建启动子荧光素酶报告基因质粒pIFN-λ1-Luc和pIFN-λ3-Luc,使用双荧光素酶报告基因、实时荧光定量PCR两种方法分别检测病毒感染、病毒蛋白表达对IFN-λ1 和IFN-λ3 启动子活性和转录本水平的调控.结果显示:成功构建了启动子荧光素酶报告质粒pIFN-λ1-Luc和pIFN-λ3-Luc,证实了PEDV AH2012/12 变异株在MARC-145 上能够抑制宿主IFN-λ产生,且非结构蛋白(NSP)1、5、9 和开放阅读框(ORF)3 下调IFN-λ1,NSP1、NSP5、NSP8 和ORF3 下调IFN-λ3,其中NSP5 的下调作用最为明显.研究结果为PEDV逃逸IFN-λ提供了理论依据,丰富了PEDV调控先天性免疫的分子机制.

关键词：猪流行性腹泻病毒、λ干扰素、非结构蛋白5、免疫逃逸

所属期刊栏目：55

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划;国家自然科学基金

在线出版日期：2023-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：48-55