4种猪腹泻病毒恒温隔绝式荧光RT-PCR检测方法的建立及应用

摘要：

为鉴别猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)这 4 种猪主要腹泻病毒,本研究分别针对PEDV M基因、TGEV M基因、PoRV NSP5 基因、PDCoV M基因设计特异性引物和探针,经过方阵法优化恒温隔绝式荧光RT-PCR(iiRT-PCR)反应条件,建立了检测这 4 种猪腹泻病毒 iiRT-PCR 方法.用建立的 iiRT-PCR 方法分别检测 PEDV、TGEV、PoRV、PDCoV、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、日本脑炎病毒(JEV),并对iiRT-PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,结果显示该方法特异性强,对PEDV、TGEV、PoRV、PDCoV的检测下限分别为102、102、103、103 TCID50/mL,并具有良好的组内和组间重复性;而荧光定量PCR方法的检测下限分别为101、102、102、102 TCID50/mL,敏感性略高于iiRT-PCR.2 种方法对 22 份临床样品的检测结果符合率为 100%,PEDV、TGEV、PoRV、PDCoV阳性率分别为 40.91%、9.09%、45.45%、9.09%,其中PEDV与PoRV混合感染率为 18.18%,PDCoV与PoRV混合感染率为 4.55%.本研究建立的iiRT-PCR为临床现场检测4 种猪腹泻病毒提供了一种简便快速的方法.

关键词：猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪德尔塔冠状病毒、恒温隔绝式荧光RT-PCR

所属期刊栏目：55

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：江苏省农业科技自主创新资金项目;江苏现代农业产业体系建设项目

在线出版日期：2023-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：83-88