兔轮状病毒VP8*蛋白原核表达、基因序列及蛋白特性分析
为深入研究兔轮状病毒VP8*蛋白的结构和功能,本研究利用生物信息学软件DNAStar对兔轮状病毒Z3171株的VP8*基因序列进行核苷酸和氨基酸同源性分析,运用生物信息学方法对该蛋白的理化性质、亲/疏水性、磷酸化及糖基化位点、结构域、中和表位及三维结构等进行了分析.设计合成引物,采用PCR方法扩增VP8*蛋白编码基因,并将目的片段克隆到pET28a(+)原核表达载体,经体外原核表达,采用亲和层析纯化获得VP8*目的蛋白.结果显示:Z3171株的VP8*基因与国内外参考序列对比,核苷酸序列同源性为32.8％-90.3％,氨基酸序列同源性为39.2％-91.9％.生物信息学分析显示该蛋白理化性质稳定,无跨膜结构域,不含有信号肽,主要定位于细胞骨架中.其中1个中和表位区域内有2个氨基酸插入,该区域三维构象亦发生变化.PCR扩增的VP8*基因条带大小为558 bp,经测序与目的基因完全一致;经SDS-PAGE和Westernblot鉴定,重组VP8*蛋白以可溶形式表达,血凝性试验结果表明该蛋白无血凝性.本研究为VP8*免疫原性分析及研制兔轮状病毒疫苗提供了参考.
兔轮状病毒、VP8*、蛋白特性、原核表达
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S855.3(动物医学（兽医学）)
山东省现代农业产业技术体系资助项目;山东省重点研发计划
2023-08-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
100-107
