鸭星状病毒血清1型单克隆抗体的制备与鉴定

摘要：

为制备鸭星状病毒血清1型(DAstV-1)单克隆抗体,本研究以原核表达的重组VP70蛋白免疫6～8周龄雌性BALB/c小鼠,3次免疫后取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合.利用间接ELISA方法筛选到5株阳性单克隆杂交瘤细胞株,分别命名为1G11、1G5、1D5、5A10和5F3.Western blot试验表明,5株单抗均能特异性识别293T细胞中表达的VP70蛋白.间接免疫荧光试验(IFA)显示,5株单抗均能与LMH细胞中的DAstV-1抗原发生特异性反应.制备小鼠腹水,通过间接ELISA检测其中VP70蛋白特异性抗体含量,其中1G1效价为1∶1 024 000,1G11和1D5效价为1∶256 000,5A10和5F3效价为1∶128 000.相加ELISA结果显示,5株单抗可能识别相同的抗原表位.本研究制备的单抗为DAstV-1检测方法的建立提供了有效材料,也为该病毒的感染与致病机制研究奠定了基础.

关键词：鸭星状病毒1型、VP70蛋白、单克隆抗体

所属期刊栏目：55

分类号：S852(动物医学（兽医学）)

资助基金：江苏现代农业水禽产业技术体系疾病防控创新团队JATS2022360JATS2022360

在线出版日期：2023-08-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：87-94