猪流行性腹泻病毒感染小鼠血清抗体间接ELISA方法的建立

摘要：

为建立检测感染小鼠血清中猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗体的方法,本研究应用PEDV受体结合区(receptor binding domain,RBD)重组蛋白作为抗原,通过探索各反应的最佳条件,并进行了该方法灵敏度、重复性、特异性分析.结果显示,最佳蛋白包被浓度为5pig/mL,待检血清稀释浓度为1:400,孵育时间为37 ℃ 30 min,羊抗鼠IgG-HRP作为二抗,孵育条件为37Ω30 min,底物显色时间为15 min.对建立的ELISA检测方法进行验证,阳性对照血清的稀释度为1:204 800倍时0D450值仍大于临界值,批内和批间的变异系数均小于10％,对猪传染性胃肠炎病毒和猪6冠状病毒抗体小鼠阳性血清检测均不发生交叉反应.结果表明本研究建立的小鼠血清PEDV抗体间接ELISA方法具有很好的灵敏度、重复性、特异性.为PEDV候选疫苗的小鼠血清特异性抗体检测提供了一种精准、高效的方法.

关键词：猪流行性腹泻病毒、受体结合区、小鼠血清、间接ELISA方法

所属期刊栏目：55

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划2021YFD1801103-6

在线出版日期：2023-08-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：64-68