猪血凝性脑脊髓炎病毒N蛋白单克隆抗体制备及表位鉴定

摘要：

为制备猪血凝性脑脊髓炎病毒(porcine hemagglutinating encephalomyelitis virus,PHEV)N蛋白的单克隆抗体,本研究构建了 pET-32a-N重组质粒,原核表达并纯化重组N蛋白,免疫BALB/c小鼠,细胞融合后利用间接ELISA进行筛选,获得了 3株稳定分泌的阳性杂交瘤细胞株,分别命名为2C3、4F3、5C6.Western blot与间接免疫荧光试验表明,3株单抗均能与293T细胞中表达的N蛋白产生特异性反应.经测定,3株单抗的效价均为1×106,重链类型均为IgG1,轻链类型均为κ.利用一系列表达的部分重叠的N截短蛋白片段,经Western blot鉴定单抗所识别的抗原表位,结果显示,267KPRQK271为单抗2C3、4F3、5C6所识别的表位.本研究为PHEV临床检测方法的建立和表位疫苗的研发奠定了基础.

关键词：猪血凝性脑脊髓炎病毒、N蛋白、单克隆抗体、表位

所属期刊栏目：55

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2023-04-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：119-124