非洲猪瘟病毒p17蛋白的哺乳动物细胞表达及鉴定

摘要：

研究旨在利用哺乳动物细胞悬浮培养系统表达非洲猪瘟病毒(ASFV)p17蛋白,纯化并免疫小鼠,制备针对ASFVp17蛋白的特异性多克隆抗体.根据GenBank中公布的ASFVSY18毒株p17蛋白编码基因序列,设计特异性引物扩增p17基因片段,构建重组真核表达质粒pCDNA3.1-p17-strep.将其瞬时转染293i细胞,并利用下游strep标签进行蛋白纯化.纯化后的重组p17蛋白配合MnJ(β)胶体锰佐剂免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体血清.利用Western blot、间接免疫荧光试验鉴定该多克隆抗体的反应原性和特异性.结果显示:本试验成功构建pCDNA3.1-p17-strep真核表达质粒,转染293i细胞后纯化获得重组p17蛋白.免疫小鼠后制备的多克隆抗体与真核表达的p17蛋白及表达ASFV p17蛋白的猪繁殖与呼吸综合征病毒均有良好的特异性免疫反应.本试验为深入探讨ASFV p17蛋白的生物学功能奠定了基础.

关键词：非洲猪瘟病毒、p17蛋白、293i细胞、多克隆抗体

所属期刊栏目：55

分类号：S823.83(家畜)

资助基金：上海市科技兴农项目;广东省重点领域研发计划;国家自然科学基金;中国农科院统筹ASFV应急专项;河北省省属高等学校基本科研业务费

在线出版日期：2023-04-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：68-73