3种牛乳外泌体提取方法的比较

摘要：

为筛选较好的牛乳外泌体提取方法,分别采用凝乳酶辅助法、等电点辅助法及EDTA辅助法提取牛乳中的外泌体,并通过纳米追踪分析、透射电子显微镜(TEM)观察、Western blot等方法来比较所提外泌体的形态、大小及蛋白浓度.结果显示:凝乳酶辅助法所获得的外泌体粒径符合正常的外泌体粒子直径范围,且粒子浓度极显著高于另外2种方法所提取的外泌体(P＜0.01);凝乳酶辅助法所提取的外泌体数量较多,且外泌体双层膜结构完整且明显,背景清晰,而其他2种方法提取的外泌体杂质较多;凝乳酶辅助法所提外泌体中含有的溶酶体相关膜蛋白(CD63)和肿瘤易感基因(TSG101)2种标志性蛋白表达量显著高于其他2组(P＜0.01).提示:利用凝乳酶预处理牛乳后再对其进行超速离心,可以获得纯度更高的外泌体,试验结果为深入研究外泌体提供了实践基础.

关键词：牛乳、外泌体、凝乳酶

所属期刊栏目：54

分类号：S828(家畜)

资助基金：陕西省重点研发项目2020FP-001

在线出版日期：2022-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：31-36