鹅细小病毒VP2蛋白单克隆抗体的研制及鉴定

摘要：

为了制备鹅细小病毒(GPV)VP2蛋白的特异性单克隆抗体,将VP2基因克隆至大肠杆菌原核表达载体pET28a(+),构建了 pET28a-VP2原核表达质粒,经过诱导表达并纯化获得了 VP2蛋白.将纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备了 3株可稳定分泌与GPV VP2蛋白结合的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为:F5-B7、C4-4和B9-C5.抗体分型结果显示,3株单克隆抗体轻链均为κ链,F5-B7和C4-4重链亚类为IgG2b,B9-C5重链亚类为IgGI.以VP2蛋白为包被抗原,采用间接ELISA方法检测表明,F5-B7和C4-4两个单抗效价可达1 ∶240 000,B9-C5单抗为1 ∶20 000.间接免疫荧光和免疫印迹试验表明,这3株抗体皆能与GPV发生特异性反应.本研究为鹅细小病毒VP2蛋白表位鉴定、病毒和VP2蛋白结构功能研究、鹅细小病毒诊断试剂的开发及基因工程抗体的研究等奠定了基础.

关键词：鹅细小病毒、VP2蛋白、单克隆抗体

所属期刊栏目：54

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：浙江省重点研发计划;浙江省公益研究计划项目;浙江省农业重大技术协同推广计划

在线出版日期：2022-09-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：85-89