1株抗猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定

摘要：

为鉴定猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳(N)蛋白的抗原表位,本研究通过原核表达N蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠,利用细胞融合和亚克隆技术,筛选出1株稳定分泌抗PEDVN蛋白抗体的杂交瘤细胞9B4.经鉴定单克隆抗体9B4的亚型为IgG1型,轻链为Kappa链.腹水抗体ELISA效价为106以上.ELISA、Western blot和免疫荧光鉴定结果显示该单克隆抗体反应原性和特异性良好.利用噬菌体展示技术对单克隆抗体9B4进行抗原表位鉴定,获得4个N蛋白的模拟抗原表位(C11、C12、C14和C26).随后分别以噬菌体阳性克隆为模拟抗原,对临床PEDV血清样品进行检测,发现其均能与猪PEDV阳性血清发生特异性结合,而与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)阳性血清、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)阳性血清不反应,说明本研究获得的N蛋白模拟表位可用于PEDV抗体的检测,有助于PED流行病学调查和PEDV疫苗免疫效果的评价.

关键词：猪流行性腹泻病毒、N蛋白、单克隆抗体、抗原表位

所属期刊栏目：54

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划;南京农业大学大学生创新训练项目;江苏高校优势学科建设工程专项

在线出版日期：2022-06-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：98-104