鸡毒支原体p24蛋白的原核表达及膜定位研究

摘要：

为研究p24蛋白在鸡毒支原体中的定位,对p24基因序列进行分析,PCR扩增p24基因并构建原核表达载体,表达p24蛋白,制备多克隆兔抗血清,ELISA测定其效价,提取鸡毒支原体总蛋白、膜蛋白、胞浆蛋白通过Western blot进行亚细胞定位.结果显示:p24基因高度保守,全长576 bp,编码192个氨基酸;成功构建表达载体pCold-p24,经转化、诱导表达后获得重组蛋白rp24,大小约为35kDa;ELISA检测兔抗rp24血清效价为1:12800,说明rp24蛋白具有很好的免疫原性;Western blot显示rp24蛋白在膜蛋白免疫印迹条带较亮,在胞浆蛋白中条带弱,证明p24主要分布在膜表面,是鸡毒支原体的膜蛋白.试验结果为后续基因工程疫苗研制、诊断试剂盒研发、致病机理研究奠定基础.

关键词：鸡毒支原体、p24基因、生物信息学、原核表达、膜定位

所属期刊栏目：54

分类号：S858.31(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;贵州省科技计划项目;贵州省科技计划项目

在线出版日期：2022-06-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：64-67