牛病毒性腹泻病毒和牛冠状病毒双重纳米RT-PCR检测方法的建立及应用

摘要：

本文建立了一种同时检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛冠状病毒(BCoV)2种病原的双重纳米RT-PCR方法.采用BVDV 5'-UTR基因序列(GenBank登录号:AB040132.1)和BCoV的N基因保守序列(GenBank登录号:KX982264.1)设计出一对BVDV特异性引物和一对BCoV的特异性引物,结果表明此方法对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛副流感病毒3型(BPIV3)和牛轮状病毒(BRV)均无交叉反应,特异性良好.同时,应用此方法检测33份腹泻牛的临床样品和25份腹泻鹿的临床样品,结果得出BVDV、BCoV和2种病原混合感染的牛样品阳性率分别为15.15％、36.36％和6.06％.鹿样品感染BVDV、BCoV和2种病原混合感染的阳性率分别为28％、8％和8％.此外,敏感性试验结果为常规RT-PCR敏感性的10倍,最低检出限为1fg.研究表明,本文建立的该方法快速、灵敏、简捷,具有较强的特异性、敏感性,可适用于大批量临床样品检测,为反刍动物相关病毒性腹泻的诊断和防控提供一定技术支撑.

关键词：牛病毒腹泻病毒、牛冠状病毒、双重纳米RT-PCR

所属期刊栏目：54

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：吉林省科技发展计划20200301016RQ

在线出版日期：2022-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：101-105