枯草芽孢杆菌细胞壁对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1表达的影响

摘要：

为探究枯草芽孢杆菌细胞壁能否对绵羊瘤胃上皮细胞(ovine ruminal epithelial cells,ORECs)中绵羊β-防御素-1(sheep β-defesin-1,SBD-1)的表达产生影响,先利用反复冻融和超声波破碎相结合的方法破碎枯草芽孢杆菌并成功收集其细胞壁,将不同浓度(0、25、50、100、200、400 μg·mL-1)的枯草芽孢杆菌细胞壁与ORECs共培养8h后,采用荧光定量PCR和酶联免疫吸附测定(ELISA)方法筛选出枯草芽孢杆菌细胞壁诱导SBD-1表达的最佳刺激浓度,最后用该浓度条件下的枯草芽孢杆菌细胞壁对瘤胃上皮细胞进行不同时间(2、4、8、12、24 h)的刺激,采用荧光定量PCR和ELISA方法筛选出枯草芽孢杆菌细胞壁诱导SBD-1表达的最佳刺激时间.结果 显示:枯草芽孢杆菌细胞壁成功制备,不同浓度(0、25、50、100、200、400 μg· mL-1)的枯草芽孢杆菌细胞壁对ORECs均无毒性作用,并能极显著促进ORECs中SBD-1 mRNA和蛋白的表达(P＜0.01),以浓度为50 μg·mL-1的枯草芽孢杆菌细胞壁刺激ORECs 12 h时SBD-1 mRNA和蛋白的表达量达到最大且与对照组呈极显著差异(P＜0.001).研究表明,枯草芽孢杆菌细胞壁刺激ORECs诱导SBD-1表达的最佳刺激浓度为50 μg·mL-1,最佳刺激时间为12 h.本研究为枯草芽孢杆菌细胞壁诱导调节SBD-1机制的研究提供理论依据.

关键词：枯草芽孢杆菌细胞壁;绵羊瘤胃上皮细胞(ORECs);β-防御素-1;荧光定量PCR

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分类号：S852.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金32060780

在线出版日期：2022-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：57-63