高密度悬浮转染方式高效获得重组杆状病毒

摘要：

为了提高低代次重组杆状病毒的病毒滴度和获得足量低代次种子批,以最大程度满足产业化生产的需求,本研究以表达猪细小病毒(PPV)衣壳蛋白VP2的重组杆状病毒质粒(Bacmid)为研究对象,分别转染贴壁Sf9细胞和高密度悬浮ExpiSf9细胞.通过重组杆状病毒滴度测定、SDS-PAGE、Western blot以及血凝效价测定等方法,对获得的重组杆状病毒滴度和VP2蛋白表达量进行评价.结果 表明,高密度悬浮转染获得的P0代重组病毒滴度、VP2蛋白表达水平和血凝效价均要高于贴壁转染方式,同时高密度悬浮转染可获得足量的P0代重组杆状病毒种子批,可为后续外源蛋白表达提供足量同质的低代次毒种,有效解决重组杆状病毒代次比较窄的问题,为后续重组杆状病毒相关产品的产业化生产奠定研究基础.

关键词：重组杆状病毒;高密度悬浮转染;贴壁转染;产业化生产

所属期刊栏目：53

分类号：S851.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划2017YFD0501306-7

在线出版日期：2021-09-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：74-78