瘤胃厌氧真菌木聚糖酶基因的表达与酶学特性研究

摘要：

旨在表达来源于瘤胃厌氧真菌基因组的4个木聚糖酶基因A、C、D和F,并比较分析其酶学特性.首先根据大肠杆菌基因编码偏好,合成可在大肠杆菌中表达的木聚糖酶基因序列,然后采用同源重组的方法将各序列分别插入载体pET-28a中,在大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌中异源表达,并研究其酶学特性,结果成功表达出来源于厌氧真菌的4个木聚糖酶基因.测定其酶学性质发现,4种木聚糖酶的反应最适pH值均为8.0;木聚糖酶D的反应最适温度为37℃,其余3种木聚糖酶的反应最适温度均为45℃;4种木聚糖酶具有广泛的温度稳定性和pH稳定性;金属离子Ca2+、Mg2+、Mn2+显著促进木聚糖酶活性(P＜0.05),而Zn2+则有明显的抑制作用(P＜0.05);4种木聚糖酶降解山毛榉木聚糖的能力显著高于其他底物(P＜0.05).本研究成功表达了4种来源于厌氧真菌的木聚糖酶,其良好的温度和pH稳定性具有潜在的工业应用价值.

关键词：木聚糖酶、厌氧真菌、大肠杆菌、异源表达

所属期刊栏目：53

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金;江苏省一带一路技术合作项目

在线出版日期：2021-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：24-30