新型猪α干扰素YNS突变体的构建及其抗病毒活性检测

摘要：

试验旨在获得高活性的猪α干扰素(porcine interferon alpha,PoIFN-α).利用融合PCR方法将天然猪α干扰素基因进行定点突变,突变位点为58H(CAT)→Y(TAC)、59E(GAG)→N(AAC)及61L(CTC)→S(AGC).将突变基因克隆到pET-32a载体上,转化至大肠杆菌Rosetta中诱导表达和鉴定,利用MTT法检测猪α干扰素对Vero细胞的抗增殖能力,利用Vero/VSV系统上测定其抗病毒活性.结果显示,重组蛋白表达形式为包涵体,蛋白分子质量约33 kDa,纯化后猪α干扰素YNS突变体蛋白的CC50为462.7 μg/mL,其抗病毒活性为1.63×106IU/mg,相比天然干扰素蛋白活性提高.本研究成功构建了高效猪α干扰素YNS突变体,为干扰素的临床应用提供理论基础.

关键词：猪α干扰素、基因突变、抗病毒活性

所属期刊栏目：52

分类号：S853(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划2017YFD0501003

在线出版日期：2021-02-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：116-120