奶牛乳房炎致病菌多重Taq-Man荧光PCR检测方法的建立

摘要：

为同时检测大肠杆菌、无乳链球菌和金黄色葡萄球菌,提高对奶牛乳房炎的诊断率,本试验针对3种病原菌的保守序列设计合成了3套特异性引物,通过优化PCR反应体系和反应条件,建立了多重Taq-Man荧光定量PCR检测方法.结果 显示,该检测方法具有高特异性,与肠炎沙门菌、肺炎克雷伯菌及鲍曼不动杆菌等无交叉反应;大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和无乳链球菌的最低检测浓度分别为103、102和104拷贝数/μL敏感度较高.DNA各个拷贝数浓度的变异系数均低于2.02％,表明重复性良好.对24份临床采集奶样的检测结果表明,建立的多重Taq-Man荧光定量PCR检测方法可用于临床大肠杆菌、无乳链球菌和金黄色葡萄球菌感染引起的奶牛乳房炎的检测,具有良好的推广应用价值.

关键词：奶牛乳房炎、Taq-Man荧光PCR、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌

所属期刊栏目：52

分类号：S858.23(动物医学（兽医学）)

资助基金：江苏省自然科学基金;农业行业标准

在线出版日期：2020-12-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：90-94