禽腺病毒血清4型纤突蛋白1(Fiber 1)多克隆抗体的制备

摘要：

为了制备禽腺病毒血清4型(FAdV-4)纤突蛋白1(Fiber 1)的多克隆抗体并对其特异性进行鉴定,将FAdV-4感染的病死鸡组织中扩增得到的Fiber 1基因构建到原核表达质粒pCold I,获得pCold Ⅰ-Fiber 1表达质粒;然后将其转入大肠杆菌Rosetta (DE3)表达菌株中,加入1mmoL/L IPTG分别于16和37℃条件下诱导表达,SDS-PAGE检测结果显示重组蛋白Fiber 1以包涵体的形式成功表达,分子质量约53 kDa.表达蛋白纯化后免疫新西兰白兔,制备得到兔源Fiber 1蛋白的多克隆抗体.Western blot检验结果表明制备的Fiber 1阳性血清1∶1000倍稀释时具有良好的反应性,间接免疫荧光试验测得多抗血清在1:3000倍稀释时,仍具有较好的活性且特异性良好.本研究为后续FAdV-4检测方法的开发及其相关致病机制的研究奠定了物质基础.

关键词：禽腺病毒4型、Fiber 1、多克隆抗体、制备

所属期刊栏目：52

分类号：S852(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划2016YFD0501600

在线出版日期：2020-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：91-96