伪狂犬病病毒变异株US3基因失活株的构建与生物学特性分析
为探究US3基因失活对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)变异株毒力的影响,运用En Passant操作技术,将PRV变异株AH02LA细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)BACPRv-G中US3基因的起始密码子进行点突变,获得重组BAC株BACPRv-G-US3mut.将BACPRV-G-US3mut与带有同源臂和PRV AH02LA gE/gI基因的片段共转染猪睾丸(ST)细胞,拯救病毒的同时将gE/gI基因进行恢复,获得重组病毒PRV-US3mut.生长动力学试验发现:PRV-US3mut在感染ST细胞早期(6h和12h)无病变发生,在感染24h之后,与亲本毒株PRVAH02LA生长动力学相似,表明US3基因可能介导病毒增殖的早期阶段.此外,研究发现了US3基因抑制PRV感染ST细胞早期组织相容性复合物I的mRNA转录.BALB/c小鼠的致病力试验发现,相较于亲本毒株PRV AH02LA(LD50=10-3.26/0.2mL),PRV-US3mut(稀释10-2～10-5)攻毒小鼠全部存活,表明US3基因可能介导PRV对小鼠的致病性.本研究成功构建了PRV变异株US3基因失活株,为研制针对PRV变异株的弱毒疫苗奠定了基础.
伪狂犬病病毒、细菌人工染色体、US3基因、点突变、生物学特性
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S230.3(农业机械化)
江苏省农业科技自主创新项目;江苏省自然科学基金
2020-09-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
95-100
