猪圆环病毒3型实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

摘要：

为建立快速、灵敏且特异的检测猪圆环病毒3型(porcine circovirus,PCV)的实时荧光定量PCR方法,本研究根据ORF2基因的保守序列设计一对特异性引物和TaqMan探针,通过构建标准品质粒来制作荧光定量PCR标准曲线,优化反应条件,验证敏感性、特异性及重复性,建立了检测PCV3的实时荧光定量PCR方法.结果 显示,该方法可以特异性检测出PCV3,而对猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪细小病毒、伪狂犬病毒等检测结果均为阴性,表明其具有良好的特异性.用构建的标准品质粒测得的灵敏度可以达到10 copies/μL,重复试验批内及批间变异系数均小于2％,表明其具有良好的灵敏性和重复性.以上结果表明,本研究建立的TaqMn荧光定量PCR检测方法具有快速、灵敏性高、特异性强的优点,可为我国PCV3型的早期检测及相关研究工作提供可靠的技术支持.

关键词：猪圆环病毒3型、TaqMan探针、实时荧光定量PCR

所属期刊栏目：52

分类号：S852.62(动物医学（兽医学）)

资助基金：上海兽用生物制品工程技术研究中心19DZ2284700

在线出版日期：2020-09-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：89-94