髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒HB2015029株感染性克隆的构建与病毒拯救

摘要：

为了拯救具有感染性的髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV) HB2015029株,本研究以含有ALV-J HB2015029株基因组片段的质粒为模板,采用高保真PCR,扩增出3段重叠并含有合适酶切位点病毒基因片段.将获得的基因组片段分别克隆至pTopo-BluntSimple载体,经过酶切、连接成功构建了含有病毒全基因组的质粒TOPO-029-ABC.将TOPO-029-ABC质粒转染进DF-1细胞进行病毒拯救,结果表明,转染72 h后的细胞上清禽白血病病毒P27抗原呈阳性;将阳性细胞上清,接种新的DF-1细胞培养3d,P27抗原ELISA检测、特异性PCR和间接免疫荧光试验均呈阳性,表明成功构建了ALV-J HB2015029感染性克隆,并拯救具有感染性的髓细胞瘤型ALV-J,命名为rHB2015029.

关键词：ALV-J、感染性克隆、病毒拯救

所属期刊栏目：52

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31640081

在线出版日期：2020-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：98-102