ATP5J促进猪繁殖与呼吸综合征病毒复制研究
为了研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)复制与细胞调控酶ATP5J的关系,本研究首先对猪源ATP5J基因进行了抗原表位分析,选取并合成了3段抗原小肽,制备ATP5J的多克隆的抗体.用制备的多抗检测了ATP5J质粒在293T细胞中过表达的情况.然后,用PRRSV感染猪肺泡巨噬细胞(PAMs),利用qPCR和Western blot检测PRRSV感染对PAM细胞中ATP5J表达的影响.最后,我们通过小RNA干扰以及过表达ATP5J,使用qPCR和Western blot技术,在PAM和Marc-145细胞上检测ATP5J变化对PRRSV复制增殖的影响.结果显示:PRRSV感染能够导致宿主细胞ATP5J蛋白表达下调;ATP5J下调时,PRRSV复制减弱;ATP5J过表达时,PRRSV复制增强,说明ATP5J能够促进PRRSV复制增殖.进一步分析证明:ATP5J促进PRRSV复制功能没有剂量依赖性.综上,PRRSV感染能够导致宿主细胞ATP5J蛋白表达下调,而ATP5J具有促进PRRSV复制的作用.该研究为阐明PRRSV与宿主相互作用提供了新思路,为解析PRRSV免疫抑制和免疫逃逸机制奠定了基础.
猪繁殖与呼吸综合征病毒、ATP5J、基因调节、病毒复制
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S852.6(动物医学(兽医学))
国家重点基础研究发展计划(973计划)2014CB542702
2018-09-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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