斑点叉尾鮰病毒焦磷酸测序检测方法的建立

摘要：

旨在建立一种基于PCR的焦磷酸测序检测方法,用于斑点叉尾鮰病毒病的快速检测和确诊.针对斑点叉尾鮰病毒(CCv)蛋白激酶(PK)基因的保守区域设计扩增引物与测序引物,经PCR扩增后对PCR产物进行焦磷酸测序,借助测序结果比对确定是否为CCV核酸序列.通过对反应条件与体系的优化,成功建立了CCV PK基因焦磷酸测序检测方法.结果表明:建立的斑点叉尾鮰病毒焦磷酸测序检测方法扩增基因片段长度为144 bp,能够特异性检测出目的病毒,最低核酸检测限为5×10-6 ng/μL,重复测序3次均能准确测出45 bp核酸序列.本研究建立的斑点叉尾鮰病毒焦磷酸测序检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好,适合高通量检测且耗时短仅需4h,为CCV的快速检测提供了一种可行方法.

关键词：斑点叉尾鮰病毒、焦磷酸测序、PCR、蛋白激酶基因、检测

所属期刊栏目：50

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家“十二·五”科技支撑计划2013BAD12B02

在线出版日期：2018-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：89-92