少孢节丛孢菌新疆分离株几丁质酶AO-14基因的克隆表达
利用RT-PCR扩增获得少孢节丛孢菌新疆分离株XJ-A1几丁质酶AO-14目的基因片段,对该基因进行克隆和分子特征分析;构建重组表达质粒pET32a-A014,转化到大肠杆菌进行诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot分析表达的重组蛋白.结果表明,AO-14基因eDNA全长为1 200 bp,编码399个氨基酸;编码蛋白几丁质酶AO-14属于糖苷水解酶18家族,具有典型的几丁质酶催化区保守序列SXGG和DGXDXD-WE,氨基酸序列的第131～ 139为活性位点所在区域,无信号肽序列.SDS-PAGE分析结果显示,AO-14表达产物的分子质量约为60ku;Western-blot分析结果表明,重组蛋白可以与抗少孢节丛孢菌多克隆抗体发生反应,证实在大肠杆菌中实现了少孢节丛孢菌XJ-A1几丁质酶AO-14基因的表达,为进一步研究少孢节丛孢菌几丁质酶AO-14生物学功能奠定了基础.
少孢节丛孢菌、几丁质酶、AO-14基因、克隆、序列分析、原核表达
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S855.9+9(动物医学（兽医学）)
国家自然科学基金;国家自然科学基金;新疆维吾尔自治区研究生科研创新项目
2017-12-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
118-123
