RNA干扰大鼠H9c2心肌细胞Hsc70基因条件筛选

摘要：

为了研究H9c2心肌细胞RNA干扰的转染条件,筛选结构型热休克蛋白70 (Hsc70)干扰序列,采用流式细胞仪和Western blot方法,研究不同剂量比例荧光标记的siRNA (FAM-siRNA)和不同浓度脂质体2000(Lipofectamine 2000)对转染效率的影响,进一步筛选Hsc70 siRNA的最佳沉默序列.结果显示:流式细胞仪试验得出的最佳转染条件为80 nmol/L FAM-siRNA+ 1.5 μL Lipofectamine 2000;Westem blot结果表明,Oligo 2、Oligo 3和Oligo 4组中的Hsc70蛋白表达极显著降低(P＜0.01),其中Oligo 3组的沉默效率最高;转染后48 h收获细胞为最佳转染时间.结果表明:80 nmol/L FAM-siRNA+1.5 μL Lipofectamine 2000为最佳转染条件,以Oligo 3为最佳RNA干扰靶基因.

关键词：心肌细胞、RNA干扰、结构型热休克蛋白70

所属期刊栏目：49

分类号：S852.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：公益性行业农业科研专项;博士启动基金

在线出版日期：2017-09-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：48-52