鼠源REG3α二聚体蛋白的体外表达及抗肝癌细胞功能

摘要：

利用巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统对鼠源胰岛再生源蛋白(regenerating islet-derived protein,REG) REG3α二聚体进行表达,并对其体外抗肝癌细胞作用进行初步研究.通过DNA重组技术构建密码子优化的重组质粒pwPICZalpha-REG3α二聚体,用电转化的方法将线性化的重组质粒pwPICZalpha-REG3α二聚体导入毕赤酵母,经甲醇诱导表达重组蛋白,并用Ni-NTA Resin柱和阴离子交换柱对其进行纯化,用纯化后的蛋白进行体外抗肝癌细胞试验,通过MTT法测REG3α二聚体蛋白对肝癌细胞的半数有效浓度.SDS-PAGE和Western blot鉴定结果显示在29.6 ku处有特异性条带,并且以剂量和时间依赖的方式抑制人肝癌细胞SMMC-7721的活性.研究表明获得了具有生物活性的鼠源重组REG3α二聚体蛋白,为进一步研究REG3α二聚体蛋白功能提供理论依据.

关键词：巴斯德毕赤酵母、REG3α二聚体、表达、纯化、抗肝癌细胞

所属期刊栏目：49

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：山西省科技攻关项目20100312016

在线出版日期：2017-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：112-117