马立克氏病毒UL36蛋白的表达及其去泛素化酶活性分析

摘要：

选取马立克氏病毒(MDV)去泛素化酶UL36蛋白N端具有蛋白酶活性的一段氨基酸序列,表达纯化并分析UL36的去泛素化酶活性特点.利用pCold TF为表达载体,并在UL36-323的C端连接Strep tagⅡ作为纯化标签,构建重组质粒pCold TF-UL36-Strep.应用大肠杆菌表达体系,低温诱导表达,并对该段蛋白进行纯化,得到可溶且纯度较高的蛋白后,通过Western blot确定所纯化的蛋白即是UL36蛋白.应用Di-Ub(K48)和SUM01-GST作为底物鉴定其去泛素化酶活性.最终得到了可溶且纯度较高的UL36-323-Strep蛋白,并且通过酶切反应确定了其去泛素化酶活性,为进一步探究UL36在MDV感染及复制中的作用奠定前期基础,也为探究MDV的致病机理提供了必要的前提条件.

关键词：MDV、UL36、蛋白纯化、去泛素化酶

所属期刊栏目：49

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金;新世纪优秀人才支持计划;教育部留学回国人员科研启动基金

在线出版日期：2017-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：77-82