水牛ghrelin基因原核表达载体构建与蛋白表达
为了研究水牛ghrelin基因的结构与功能,本试验对水牛ghrelin基因进行原核表达载体构建与融合蛋白表达条件的优化.采用RT-PCR方法从水牛胃组织的总RNA中扩增出ghrelin编码区,连接到pRSET-a载体中,转化大肠杆菌BL21 (DE3),挑取阳性克隆子,用IPTG进行诱导表达条件的优化.结果表明,成功构建原核表达载体pRSET-a-ghrelin,在2mmol/L IPTG,37℃的条件下诱导表达4h,水牛ghrelin重组蛋白可成功获得表达,经SDS-PAGE鉴定发现,ghrelin融合蛋白主要以包涵体形式存在,分子量约为20 ku,其表达量占总菌体蛋白量的35%.本试验结果为进一步研究水牛ghrelin基因的结构和功能提供有价值的生物学信息.
Ghrelin、水牛、基因克隆、原核表达
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S855.3(动物医学(兽医学))
广西自然科学基金;广西大学科研基金资助项目
2017-01-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共3页
76-78