猪Zfy基因干扰载体的构建及性控效果的验证
为了探究Zfy基因在性别控制中的作用,试验运用RNAi技术,设计并合成了2对靶向猪Zfy基因的shRNA序列,构建了重组质粒(shRNA-a,shRNA-b),将其转染到体外培养的猪生精细胞中,荧光实时定量PCR (qRT-PCR)检测生精细胞中Zfy基因mRNA的表达,然后选取4头健康公猪进行体内干扰试验,分为A组和B组,每组2头,将重组质粒注射到猪睾丸中,A组注射shRNA-a,B组注射shRNA-b,对照组为试验猪场不进行注射的公猪,观察子一代性别比例.结果显示,qRT-PCR检测shRNA-a和shRNA-b对生精细胞中Zfy基因的抑制效率分别为33% (P<0.05)和89%(P<0.005).体内干扰试验中,对照组子一代仔猪雌性率为56.16%,A组、B组子一代仔猪雌性率分别为34.87% (P<0.005)和47.22% (P>0.05).本试验成功构建干扰猪Zfy基因的重组质粒,并应用于动物试验,证实Zfy基因可以影响后代的性别比例,在动物性别控制中发挥一定的作用,但导致体内干扰试验结果与预期结果相反的原因仍需进一步验证.
Zfy基因、性别控制、RNAi、精子发生
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S828(家畜)
科技型中小企业技术创新基金2014AB012
2017-01-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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