猪丹毒杆菌噬菌体裂解酶的原核表达及活性检测
根据猪丹毒杆菌噬菌体基因测序结果,设计针对裂解酶(Ely)的特异性扩增引物,PCR扩增获得Ely产物,PCR产物经酶切后克隆人表达载体pET-28a(+),获得重组质粒pET-28a(+)-Ely,并转化至大肠杆菌BL21 (Rosetta)中.以1mmol/L IPTG在28℃诱导8h,SDS-PAGE结果表明,蛋白在上清中高效表达;通过Ni2+-NTA亲和层析法纯化目的蛋白,其纯度在90％以上;以100、10和1μg/mL的终浓度作用于猪丹毒杆菌培养物,每隔1h进行一次菌落计数,直至7h,结果表明该裂解酶在体外可以有效裂解猪丹毒杆菌,并呈一定的时间和剂量依赖性.该研究将为治疗耐药性猪丹毒杆菌感染提供新的思路.
猪丹毒杆菌、噬菌体、裂解酶、表达、活性
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S852.6(动物医学（兽医学）)
2016-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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