木质素降解菌的筛选及其漆酶性质研究
为筛选产漆酶的木质素降解菌,采用愈创木酚平板法和RB亮蓝平板法进行菌株筛选,利用16S rDNA序列分析对菌株进行鉴定,通过液体发酵培养对漆酶活性和木质素降解能力进行研究.将漆酶基因cotA克隆到表达载体pET-32a(+)上获得重组质粒pET-32a(+)-CotA并转化到BI21中进行表达,通过酶活测定将表达条件进行优化.结果:从白蚁肠道中成功筛选出1株产漆酶的木质素降解菌,鉴定为枯草芽胞杆菌.漆酶的最适酶活温度为60℃,最适酶活pH为3.5 ～4.0;0.2 mmol/L Cu2+可诱导菌株漆酶的产生,缩短了产酶时间并提高了酶活性.菌株木质素降解率在液体发酵培养24h后达到了17.1％.漆酶基因大小为1 542 bp,表达的重组蛋白为85 ku,属于有活性的可溶性蛋白.在IPTG浓度为1 mmol/L、Cu2+浓度为0.3 mmol/L、诱导时间为9h的条件下,漆酶蛋白活性可达到113.10 U/L.研究表明,本试验成功筛选出1株降解木质素能力较强的枯草芽胞杆菌,获得可分泌较高活性漆酶的重组菌,为木质素酶在畜牧业生产实践上的应用奠定了基础.
木质素降解菌、漆酶、枯草芽胞杆菌、筛选、表达
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S852.6(动物医学（兽医学）)
江西农业大学博士启动基金09003897;江西省科技支撑计划20142BBF60001
2015-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
35-40
