猪乙型脑炎病毒Ⅰ、Ⅲ型的RT-LAMP检测方法建立与应用

摘要：

参考GenBank中猪乙型脑炎病毒(JEV)Ⅰ型和Ⅲ型毒株的E基因序列,通过比对分析,选取8个保守区域设计了6条引物,经条件优化及临床样品验证,本研究建立了能同时检测JEV Ⅰ型和Ⅲ型毒株E基因的RT-LAMP方法.该方法的最低检测灵敏限度为15 copies,具有较好的特异性,对猪常见病原如猪流感病毒(SIV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV),猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),猪细小病毒(PPV)和伪狂犬病病毒(PRV)等均没有特异性扩增.与RT-PCR检测方法相比,其灵敏性高10倍.用本研究建立的RT-LAMP方法检测来自屠宰场的1 500份猪血清,阳性检出率为0.4％,与RT-PCR吻合率达100％,表明本试验建立的RT-LAMP方法适用于Ⅰ、Ⅲ基因型JEV的快速、批量筛检,为JEV感染的流行病学调查提供了必要的技术手段.

关键词：猪、乙型脑炎病毒、环介导等温扩增、诊断

所属期刊栏目：47

分类号：S858.28(动物医学（兽医学）)

资助基金：上海市农业遗传育种重点实验室开放基金Shagb2012-01

在线出版日期：2015-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：26-30