小鼠肝炎病毒A59毒株结构蛋白基因的克隆

摘要：

为获得小鼠肝炎病毒(mouse hepatitis virus,MHV)结构蛋白基因S1、S2、M及N,分别构建了4个重组质粒.依据GenBank公布的MHVA59毒株RNA全序列设计4对特异性引物,以A59 RNA反转录得到的cDNA为模板,通过PCR扩增出S1、S2、M及N这3个结构蛋白基因的4个片段,分别将其通过A-T连接入pMD-20 T载体后,双酶切鉴定正确后,送出测序确认.将测序结果与GenBank序列比对,确认扩增得到的S1、S2、M及N的核酸序列与其相似度分别为100％,99％,100％和99％.试验成功扩增出S1、S2、M及N的核酸序列,其构建的重组质粒可以作为检测MHV的阳性对照,为建立RT-PCR快速检测试验小鼠MHV的方法提供生物材料.

关键词：小鼠肝炎病毒、RT-PCR、克隆

所属期刊栏目：46

分类号：S852.6(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2015-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：80-82