猪繁殖与呼吸综合征病毒截短GP5蛋白间接ELISA方法的建立

摘要：

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染主要引起母猪繁殖障碍和新生仔猪呼吸道症状,目前尚无有效的血清学检测方法评价猪群疫苗免疫或感染后抗体水平与免疫保护力之间的关系.为建立PRRSV GP5蛋白的ELISA方法,本研究选择GP5蛋白亲水区进行原核表达,以表达的重组蛋白tGP5为包被抗原建立了检测针对GP5蛋白抗体的ELISA方法,优化后反应条件为:抗原包被浓度2μg/mL,37℃包被2h,5％脱脂乳37℃封闭2h,待检血清稀释度1∶100,37℃作用1h,二抗1∶20000稀释,37℃作用45 min,37℃显色3 min,抗体临界值OD450mm≥0.22判为阳性,OD450nm＜0.183判为阴性,介于两者之间为可疑.特异性和重复性试验证明,与猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型、猪口蹄疫病毒血清抗体无交叉反应,批内、批间重复性较好.

关键词：PRRSV、重组蛋白tGP5、原核表达、间接ELISA

所属期刊栏目：46

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：公益性行业农业科研专项项目200903036-10

在线出版日期：2014-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：36-40