猪传染性胃肠炎病毒S基因B和C抗原位点片段在多表达系统中的表达及初步应用
本研究分别用巴斯德毕赤酵母、杆状病毒和大肠杆菌表达系统中表达的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) TH-98株纤突蛋白(S)基因5’端含有B和C抗原位点的片段,利用Dot-ELISA方法对表达蛋白进行了抗原性比较分析,初步建市了以巴斯德毕赤酵母系统表达的重组蛋白为包被抗原的TGEV Dot-ELISA检测方法.结果表明:两种真核系统中表达的重组蛋白的抗原性相对更强.抗原最佳包被量为50 ng,抗体稀释度1∶100,最适封闭液为10 mg/L牛血清白蛋白,血清反应时间为60 min;酶标二抗的工作浓度为1∶ 1000,反应时间为30 min,底物在室温显色时间为5 min.本研究建立的Dot-ELISA方法对猪呼吸道冠状病毒、猪轮状病毒、猪瘟病毒和猪流行性腹泻病毒阳性血清的检测结果均为阴性,特异性良好.与Svanova TGEV/PRCV抗体诊断试剂盒比较,此方法的特异性和符合率分别为90%和87%.
TGEV、纤突蛋白、抗原表位、Dot-ELISA
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S852.65(动物医学(兽医学))
黑龙江省普通高等学校青年学术骨干支持计划;国家科研启动基金
2012-10-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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