兔出血症病毒和巴氏杆菌双重PCR检测方法的建立及应用

摘要：

参照GenBank公布的免出血症病毒(RHDV) VP60、巴氏杆菌kmt基因序列,设计两对引物,分别用于扩增RHDV的VP60和巴氏杆菌kmt基因的目的片段.通过正交试验,对反应各组分浓度与组合、反应退火温度及反应参数进行优化,最后建立了RHDV、巴氏杆菌双重PCR检测方法并进行临床应用.结果显示:本试验建立的双重PCR检测方法能够特异性地检测RHDV及巴氏杆菌,最低核酸检出限分别达到70 pg和62pg.检测免源大肠杆菌、葡萄球菌和链球菌,结果均为阴性.用本方法对临床送检的104份病料进行检测,结果检出RHDV与巴氏杆菌混合感染1份,巴氏杆菌单独感染10份,双重PCR检测结果与临床病原分离结果完全一致.表明本试验建立的兔出血症病毒和巴氏杆菌双重PCR检测方法具有良好的临床应用价值.

关键词：兔出血症病毒、巴氏杆菌、双重PCR

所属期刊栏目：44

分类号：S855.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：广西壮族自治区水产畜牧局科研计划桂鱼牧科”2008”283号

在线出版日期：2012-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：21-25