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大肠杆菌O157:H7实时定量PCR检测方法的建立

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根据GenBank公布的大肠杆菌O157:H7的Flic(H7)基因序列进行同源性比较分析,选择保守序列设计一对特异性扩增引物,通过优化反应条件,建立一个用于大肠杆菌O157:H7快速定量检测的实时定量PCR方法.该方法的最低检测极限是103CFU/mL,敏感性比常规PCR提高10倍.方法重复性好、特异性强,重复性检测的变异系数均小于2%;只能检测大肠杆菌O157:H7,对非大肠杆菌O157:H7血清型细菌、猪链球菌2型、副猪嗜血杆菌无反应.利用此方法对模拟样本进行定量检测,其结果与平板细菌计数基本一致,表明此方法可作为大肠杆菌O157:H7快速诊断和疫情监测的一种快速、准确、简便的检测工具.

大肠杆菌O157:H7、实时定量PCR、Flic(H7)基因

43

S852.612(动物医学(兽医学))

广西科技攻关项目桂科攻0919004-3C

2011-09-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共5页

5-9

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畜牧与兽医

0529-5130

32-1192/S

43

2011,43(5)

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