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腺病毒穿梭载体介导牛源新孢子虫NcSAG1基因转染293细胞的表达

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为了解腺病毒穿梭载体介导NcSAG1基因在293细胞中的表达情况,本试验应用PCR技术扩增牛源新孢子虫NcSAG1基因,构建pMD18T-NcSAG1克隆质粒和腺病毒重组穿梭质粒pCR259-NcSAG1,将鉴定正确的pCR259-NcSAG1重组质粒转染293细胞,应用免疫荧光试验(IFA)和Western blot技术检测pCR259-NcSAG1重组质粒在293细胞中的表达.结果显示:扩增的牛源新孢子虫NcSAG1基因长度为982 bp,与GenBank中发表的NcSAG1(AF132217)核苷酸序列同源性为99%,IFA检测构建的pCR259-NcSAG1重组质粒在293细胞中得到瞬时表达,Western blot分析表达蛋白的分子置为33 ku,具有较好的反应原性.本试验为NcSAG1腺病毒载体疫苗的构建奠定了基础.

NcSAG1基因、腺病毒穿梭载体、293细胞、表达

43

S828.2(家畜)

延边大学研究生科研项目延大研科合字2010第1号

2011-09-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共3页

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畜牧与兽医

0529-5130

32-1192/S

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2011,43(3)

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