荧光定量PCR检测硬蜱体内莱姆病螺旋体的研究
为建立一个荧光定量PCR检测硬蜱体内莱姆病螺旋体的方法,根据GenBank登录的莱姆病螺旋体鞭毛蛋白FlaB序列,应用生物学软件进行序列比对,在保守的C段区设计与筛选特异引物和TaqMan探针.对荧光定量PCR反应体系与条件进行优化,验证方法的特异性、敏感性,并通过对感染螺旋体的蜱样本的检测,评价该方法的实用价值.结果显示,自然感染莱姆病螺旋体的35份蜱标本检测阳性符合率100%,正常蜱20份标本的检测结果均为阴性.该方法对牛巴贝斯原虫、泰勒原虫、边缘无浆体、金龟子绿僵菌、大肠杆菌等蜱体常见病原微生物所抽提的DNA的检测均呈阴性.荧光定量PCR方法检测质粒的灵敏度可达1×102拷贝/μL.TaqMan荧光定量PCR方法检测硬蜱体内莱姆病螺旋体具有较好的敏感性和特异性,可适于莱姆病的流行病学调查和监控.
硬蜱、莱姆病、伯氏疏螺旋体、荧光定量PCR
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S852.7(动物医学(兽医学))
上海市科委标准化专项07DZ05028
2010-04-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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